標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)規(guī)范

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種傳統(tǒng)的分子生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)方法，也是一種廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、臨床等領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。潔凈實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)室均已通過醫(yī)藥潔凈檢測中心檢測，為萬級潔凈實(shí)驗(yàn)室。主要開展項(xiàng)目為：CIK細(xì)胞免疫治療、DC－CIK免疫治療、超級免疫粒細(xì)胞治療等。潔凈實(shí)驗(yàn)室普通潔凈實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)不具有傳染性，但要求環(huán)境對實(shí)驗(yàn)本身不造成不良影響，因此實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不設(shè)防護(hù)設(shè)施，而潔凈度必須達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求，所以要進(jìn)行一下實(shí)驗(yàn)室消毒。其特點(diǎn)是微量DNA大量增加。潔凈實(shí)驗(yàn)室普通潔凈實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)不具有傳染性，但要求環(huán)境對實(shí)驗(yàn)本身不造成不良影響，因此實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不設(shè)防護(hù)設(shè)施，而潔凈度必須達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求，所以要進(jìn)行一下實(shí)驗(yàn)室消毒。實(shí)驗(yàn)室分為四個(gè)區(qū)域。進(jìn)入每個(gè)工作區(qū)域必須嚴(yán)格在一個(gè)單一的方向，不同的工作區(qū)使用不同的工作服(如不同的顏色)。工作人員離開每個(gè)工作領(lǐng)域時(shí)，不得脫掉工作服，每件工作服如下：

1.試劑配制區(qū)

2.樣品處理區(qū)

3.核酸擴(kuò)增區(qū)

4.產(chǎn)物分析區(qū)

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（面積980平方尺，地點(diǎn)：谷醫(yī)療南沙工業(yè)孵化器）

PCR實(shí)驗(yàn)室可以是分散的或組合的。一組PCR實(shí)驗(yàn)通常應(yīng)通過四個(gè)實(shí)驗(yàn)過程：試劑制備、樣品處理、核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析。如果試驗(yàn)過程需要，也應(yīng)增加樣品壓碎過程。

PCR實(shí)驗(yàn)室的分散形式

所謂分散式pcr實(shí)驗(yàn)室，是指完成上述實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)室彼此相距較遠(yuǎn)，以分散布置的形式存在。對于這種pcr實(shí)驗(yàn)室的布置，由于實(shí)驗(yàn)不易相互干擾，不需要特殊的條件。

二.組合形式的PCR實(shí)驗(yàn)室

所謂PCR實(shí)驗(yàn)室的組合，是指完成設(shè)置在相鄰的一PCR實(shí)驗(yàn)四個(gè)實(shí)驗(yàn)的空間，在獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)的形式的組合物。對于PCR組合實(shí)驗(yàn)室，由于集中設(shè)置在每個(gè)實(shí)驗(yàn)之間，容易造成干擾，因此，對整個(gè)系統(tǒng)的布局和阻擋某些要求。在每個(gè)腔室的入口緩沖器之間設(shè)置，以減少室內(nèi)和室外空氣交換。試劑制備室和所述樣品處理室壓力為略微期望防止含有氣溶膠到核酸外部空氣，造成污染;核酸擴(kuò)增隔室和產(chǎn)物分析稍為負(fù)壓室應(yīng)防止擴(kuò)散出含有樣品和試劑的核酸污染氣霧劑。

如果使用熒光PCR儀器，可以將擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室結(jié)合起來。

如果房間深度允許，可以設(shè)置PCR內(nèi)部專用走廊。應(yīng)該指出，在減少室內(nèi)和室外空氣交換方面，緩沖比專用走廊更有意義。

應(yīng)具有的實(shí)驗(yàn)程序，單向流動流中的各個(gè)區(qū)域中，氣流的流動，單向流動形成保護(hù)屏障，以防止實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾，所述核酸以防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)程序產(chǎn)生虛假的結(jié)果。

PCR實(shí)驗(yàn)室的氣流方向必須嚴(yán)格按照試劑儲存區(qū)和制備區(qū)樣品制備區(qū)的擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)氣壓逐漸降低的方式進(jìn)行，防止擴(kuò)增產(chǎn)物沿氣流進(jìn)入預(yù)擴(kuò)增區(qū)需要嚴(yán)格的通風(fēng)設(shè)計(jì)。如果通風(fēng)設(shè)計(jì)不合理，會使風(fēng)速和流向混淆，甚至危害人體健康。